Вестерн-блоттинг и болезнь Лайма. Интерпретация результатов теста

Вестерн-блоттинг проводится, когда у пациента есть подозрение на болезнь Лайма. Тест Western Blot ищет специфические антитела против бактерий, вызывающих болезнь Лайма. Что такое вестерн-блоттинг? Как интерпретировать результаты теста?

Вестерн-блоттинг - это тест, который ищет антитела, вырабатываемые вашим организмом против бактерий, вызывающих болезнь Лайма. На поверхности бактерий есть антигены, против которых организм вырабатывает специфические антитела класса IgM и IgG. IgM.

Иммуноглобулины M (IgM) вырабатываются, когда наш организм впервые вступает в контакт с данным патогеном. Увеличение количества IgM против данного патогена указывает на недавний болезненный процесс.

Иммуноглобулин G (IgG) вырабатывается организмом позже, чем IgM, наивысший уровень достигается примерно через шесть месяцев после заражения и, в отличие от антител IgM, они могут оставаться в крови очень долго, даже несколько лет.

Оглавление:

1. Вестерн-блот тест - показания к тесту
2. Вестерн-блоттинг - что это?
3. Вестерн-блоттинг - когда делать?
4. Вестерн-блот тест - положительный
5. Вестерн-блот тест - отрицательный

Вестерн-блот тест - показания к тесту

Вестерн-блоттинг используется на втором этапе диагностики болезни Лайма - когда тест ELISA (это тест первого выбора) дал положительный или сомнительный результат. Однако он не используется, если тест ELISA дал явно отрицательный результат.

Вестерн-блоттинг - что это?

Вестерн-блоттинг при болезни Лайма позволяет точно определить антитела к различным бактериальным фрагментам. Наконец, различные антитела к отдельным бактериальным фрагментам графически представлены в виде черных полос на нитроцеллюлозной мембране.

Не выполняйте этот тест вскоре после укуса клеща. Подождите минимум 4 недели. Стоимость Вестерн-блоттинга в обоих классах составляет примерно 150-300 злотых.

1. Для проведения теста необходимы два основных элемента - сыворотка крови пациента и убитые и измельченные культивированные бактерии Лайма.
   
   
2. Под действием электрического тока бактерии, полученные из клеточной культуры, распадаются на основные факторы, в том числе к бактериальным белкам (антигенам). Затем эти белки переносятся на нитроцеллюлозную мембрану. Мембрану нарезают полосками.
   
   
3. Полоска с антигенами после объединения с сывороткой крови пациента окрашивается с использованием специальной техники, которая выявляет антитела, специфически связанные с антигенами спирохет Borrelia.
   
   
4. В местах, где антитела пациента связываются с белками (антигенами) бактерий Лайма, мы видим характерные полосы, называемые полосами (что указывает на инфицирование бактериями Лайма. Результат теста положительный).

Каждая полоса соответствует бактериальному белку (антигену). Если белки Лайма и антитело не объединятся, полоса не появится. Тогда результат отрицательный.

Читайте также: Блуждающая эритема после укуса клеща. Как это распознать? Тесты на болезнь Лайма - как они выглядят и цена Тесты на болезнь Лайма Тест трансформации лимфоцитов (LTT) Важно

Вестерн-блоттинг - когда делать?

Ранняя диагностика болезни Лайма может быть проблематичной из-за так называемого серологическое окно. Это период от начала инфекции до выработки в организме определяемых антител. При болезни Лайма серологическое окно длится в среднем 4 недели.

Проведение тестов в течение 4 недель после укуса клеща создает риск получения ложноотрицательного результата.

При выполнении теста Лайма не следует делать его сразу после укуса клеща, вы должны подождать не менее 4 недель. Это примерно время, необходимое иммунной системе для выработки антител, обнаруженных с помощью этого теста.

Вестерн-блот тест - положительный

Наличие антител против боррелий означает, что у вас болезнь Лайма. Однако сложно ответить на вопрос, активна инфекция или нет.

Антитела IgG, образующиеся в результате инфекции, могут быть обнаружены в крови даже через 10, а иногда даже через 20 лет после постановки диагноза болезни Лайма.

Также бывает, что обнаруженные антитела IgM (обычно считающиеся маркером активной инфекции) могут быть стойкими и также не указывать на активную инфекцию.

Вестерн-блот тест - отрицательный

Тест может быть отрицательным в начальной стадии заболевания, то есть в первые несколько недель после укуса.

Вестерн-блоттинг можно проводить не только при подозрении на болезнь Лайма, но и при заражении бактериями H. pylori (вызывающими язвенную болезнь) или ВИЧ.

Вестерн-блоттинг также может дать ложноотрицательный результат в другой ситуации - когда при старой хронической болезни Лайма выработка антител была остановлена ​​бактериями Лайма или когда антитела были полностью израсходованы в борьбе с болезнью.

Если подозрение на болезнь Лайма велико, следует повторять Вестерн-блоттинг несколько раз, например, каждые несколько недель, чтобы определить момент, когда антитела присутствуют в крови.

Наличие антител при активной болезни Лайма меняется, и человек с отрицательным результатом имеет шанс получить положительный результат при повторном тесте через несколько недель. Иногда подтверждение болезни удается получить только в четвертый или пятый раз.

Некоторые врачи пытаются подтвердить инфекцию другим способом: они лечат пациента антибиотиками в течение нескольких недель и, выждав 5-6 недель, направляют пациента на Вестерн-блоттинг.

Лечение антибиотиками может не вылечить хроническое заболевание за такое короткое время, но оно настолько изменит иммунную систему, что в крови накопится достаточно антител для обнаружения. Результаты вестерн-блоттинга должен интерпретировать врач, специализирующийся на лечении болезни Лайма.

Тест WB можно проводить во время антибиотикотерапии, но с антибиотиками вероятность положительного результата немного ниже. Самый простой способ определить заболевание с помощью этого теста - провести тест через 6 недель после прекращения антибактериальной терапии.

Рекомендуемая статья:

ПЦР (исследование) - приложение. Что такое метод ПЦР? Важный

Интерпретация теста - это интерпретация полос. В целом следует исходить из того, что чем больше полосок, тем надежнее диагноз. Три полосы - это действительно много уверенности, а 5-6 полос - бесспорная болезнь Лайма.

Полосы IgM являются более диагностическими, поскольку они предполагают активную болезнь Лайма, хотя обнаруженные антитела IgM (полосы IgM) могут быть стойкими и не указывать на активную инфекцию. Оказывается, уровень IgM высок в начале инфекции и - как бы вопреки логике - при хронической болезни Лайма.

Повышенный уровень антител IgG можно считать пережитком перенесенной инфекции или хроническим активным заболеванием.

Даже отрицательный результат теста не означает, что болезнь Лайма не возникает. Отрицательный результат теста означает только то, что в крови нет антител к бактериям Лайма - это может быть, например, когда бактерии попали в организм и выработка антител еще не началась (врачи называют этот период серологическим окном).

Из-за разнообразной методики проведения этого исследования сложно найти универсальные рекомендации по интерпретации. Каждая лаборатория использует свои критерии.

Заболевание может диагностировать только специалист на основании симптомов и лабораторных исследований. Western-Bblot нельзя интерпретировать без ссылки на симптомы.

Поэтому не рекомендуется мониторинг титров антител для оценки эффективности лечения.

Какие анализы необходимо провести для выявления болезни Лайма?

Источник: x-news.pl/Dzień Dobry TVN

Библиография:

1. Болезнь Лайма и сопутствующие инфекции, под ред. Лек. А. Климашевский, Ассоциация болезни Лайма