Проточная цитометрия: показания и курс

Проточная цитометрия - это метод диагностики и исследования, известный много лет и широко используемый в онкологии. Проточная цитометрия позволяет исследовать клетки, составляющие суспензию в ламинарном или стратифицированном потоке жидкости, с помощью устройства, называемого проточным цитометром. Каковы показания к проточной цитометрии и как это делается?

Проточная цитометрия используется в диагностике гематологических новообразований, потому что это жидкие опухоли, но это только вспомогательный метод. Однако стоит помнить, что есть один вид рака, который можно диагностировать только этим методом. Это хронический лимфолейкоз.

При других неопластических заболеваниях проточная цитометрия используется в качестве диагностического средства, поскольку она показывает очень важные особенности неопластических клеток. Этот метод также используется для оценки эффективности применяемого лечения.

Проточная цитометрия - что она показывает?

Жидкий поток, содержащий исследуемые частицы, проходит с постоянной скоростью (100-2000 частиц в секунду) через измерительную зону цитометра. Здесь оптические методы анализируют формы, размеры, внутреннюю структуру клеток и их содержимое, например ДНК. Все клетки имеют оптическую метку.

Измерения основаны на свойствах рассеяния лазерного света отдельными клетками или их компонентами (ядрами, хромосомами, митохондриями) или индуцированной ими флуоресценции.

Оптические сигналы преобразуются в электрические, которые после анализа графически отображаются в виде моно- или бипараметрических распределений.

Цитометр также обеспечивает сегрегацию частиц после выхода из зоны измерения. Можно сказать, что аппарат упорядочивает (разделяет) клетки с одинаковыми составными элементами (препаративная сортировка) или выделяет определенные типы клеток (аналитическая сортировка).

Проточная цитометрия позволяет изучать популяционные характеристики клеток, анализ клеточных компонентов (особенно таких как нуклеиновые кислоты, белки, поверхностные и клеточные антигены), ферментативной активности, мембранного потенциала, митохондриальной активности, внутриклеточного pH, транспорта ионов и текучести мембран.

Проточная цитометрия - применение

Проточная цитометрия, используемая в диагностике, позволяет определять фенотип неопластических клеток и экспрессию отдельных белков. Для этого используются меченые флуоресцентные антитела, которые характерным образом связываются с антигенами на поверхности клеточной мембраны. Благодаря этому можно определить степень их дифференциации, происхождение, прогностические и терапевтические маркеры, что облегчает принятие решения о дальнейших диагностических и лечебных процедурах.

Еще одно применение проточной цитометрии - мониторинг эффективности применяемого лечения путем оценки так называемого «остаточное заболевание», то есть процент клеток с опухолевидным фенотипом, которые остаются после лечения.

Проточная цитометрия также облегчает исследования раковых заболеваний. Благодаря этому методу можно искать, например, рецепторы, которые расположены на поверхности неопластических клеток и могут стать объектами лечения.

Метод позволяет оценить активность белков внутри клетки. Также можно оценить клеточный цикл, например, путем определения количества ДНК в клетке.

В процессе пролиферации клетка проходит фазы клеточного цикла, в которых она удваивает количество ДНК. Оценивая это количество, можно указать, в какой фазе находятся клетки, пролиферируют ли они или нет, или переходят ли они в фазу апоптоза. Другими словами, с помощью проточной цитометрии вы можете узнать, готовятся ли клетки к апоптозу, процессу запрограммированной смерти.

Проточная цитометрия - будущее

Проточная цитометрия известна и используется в медицине уже несколько десятилетий. Однако он постоянно совершенствуется и создает новые диагностические и исследовательские возможности. В первый период использования этого метода можно было определить только размер и степень зернистости ячеек.

Использование лазерного света в устройствах проточной цитометрии позволяет возбуждать определенные флуоресцентные маркеры, а затем оценивать их излучение. Современные цитометры позволяют значительно увеличить количество маркеров, которые оцениваются за один раз, что определенно приводит к увеличению чувствительности этого метода.

Именно поэтому его используют не только для диагностики новообразований, но и для оценки эффективности лечения.

Об авторе

Анна Ярош Журналист, занимающийся популяризацией санитарного просвещения более 40 лет. Победитель многих конкурсов для журналистов, занимающихся медициной и здоровьем. Она получила, среди прочего Премия доверия «Золотой ОТИС» в категории «Медиа и здоровье», г. Санкт-Петербург. По случаю Всемирного дня больных Камил награжден дважды «Хрустальным пером» в национальном конкурсе журналистов, пропагандирующих здоровье, а также множеством наград и отличий в конкурсах «Медицинский журналист года», организованных Польской ассоциацией журналистов за здоровье.

Прочитать больше статей этого автора