Диагностический тест ANA (антинуклеарные антитела)

Тест на антинуклеарные антитела (ANA) используется в качестве основного теста для оценки состояния пациента с аутоиммунными заболеваниями соединительной ткани. Это расстройства, которые поражают многие ткани и органы по всему телу. Что показывают результаты теста? Что такое ANA? Какие заболевания можно выявить?

Оглавление:

1. ANA-тест - что такое антинуклеарные антитела?
2. Тест ANA - использование в диагностике
3. Тест ANA - наличие ANA в крови здоровых людей
4. Тест ANA - как называется?
5. Тест ANA - когда следует проводить тест ANA?

Аббревиатура ANA происходит от английского названия anti-Nuclear antibodies, которое переводится на польский язык как «антинуклеарные антитела». Эти молекулы принадлежат к белкам, называемым аутоантителами, которые представляют собой белки, которые атакуют организм, который их производит.

ANA-тест - что такое антинуклеарные антитела?

В организме человека есть множество защитных механизмов от болезнетворных микроорганизмов. Один из них - гуморальный иммунитет. Он основан на выработке защитных антител. У здоровых людей иммунная система вырабатывает антитела против чужеродных антигенов.

Однако иногда бывают ситуации, когда вырабатываются аутоантигены, направленные против белков в нашем собственном организме. Этот процесс важен для возникновения аутоиммунных заболеваний.

Антинуклеарные антитела атакуют белки и другие молекулы, составляющие ядро.

Есть много разных типов ANA. Распад этих антител основан на типах ядерных компонентов, против которых эти молекулы направлены. В зависимости от типа АНА могут связываться как с отдельными белками, так и со сложными комплексами.

Например, есть антитела против ядерных каналов и гистонов, то есть молекул, на которых намотана ДНК.

Атакующие ANA можно выделить:

• ПОГАГА
• гистоны
• рибонуклеопротеины
• Ядерная РНК
• негистоновые белки

Все перечисленные компоненты характерны для ядра клетки.

АНА присутствуют в крови при различных заболеваниях. Это включает аутоиммунные заболевания, рак и некоторые типы инфекций. Это позволяет использовать антинуклеарные антитела для диагностики определенных болезненных состояний.

Тест ANA - использование в диагностике

Тест ANA используется для обнаружения антинуклеарных аутоантител в крови пациента. Это обследование важно для диагностики таких заболеваний, как:

• системная красная волчанка
• Синдром Шегрена
• склеродермия
• полимиозит
• дерматомиозит
• аутоиммунный гепатит
• катание, вызванное лекарственной реакцией

Положительный результат теста ANA является диагностическим только при наличии клинических признаков, подтверждающих его. Тестирование на антинуклеарные антитела также может быть полезным для мониторинга прогрессирования заболевания.

Типичные тесты, используемые для обнаружения и оценки ANA:

• непрямая иммунофлуоресценция
• ИФА-иммуноферментный тест

Метод непрямой иммунофлуоресценции

Непрямая иммунофлуоресценция - один из наиболее часто используемых тестов ANA. Обычно в этом тесте используются клетки Hep-2. Они наносятся тонким слоем на предметные стекла микроскопа. Затем на них помещается сыворотка, собранная у пациента, и инкубируется вместе с клетками Hep-2.

Если ANA присутствуют в взятом образце, они обнаруживаются после инкубационного периода в форме, связанной с антигенами в ядре клетки. Это можно увидеть, добавив флуоресцентную метку, которая связывается с антителами.

Для этой цели чаще всего используются флуоресцеин или изотиоцианат родопсина B (FITC) или родопсин B. Молекула флуоресцирует, когда на нее воздействует луч света определенной длины волны. Микроскоп используется для наблюдения и оценки флуоресценции.

В клетках HEp-2 можно наблюдать различные паттерны флуоресценции в зависимости от типа антитела, присутствующего в сыворотке крови человека, и локализации антигена. Их анализ позволяет определить типы антител, присутствующих в образце.

Уровни антител определяют путем проведения серийных разведений сыворотки крови. Тест ANA считается положительным, если флуоресценция наблюдается при титре 1: 40/1: 80. Однако результат выше 1: 160 имеет важное диагностическое значение.

Иммуноферментный анализ (ELISA)

Иммуноферментный анализ (ELISA) использует микротитрационные планшеты с антигенами для обнаружения ANA. Каждая лунка планшета покрыта одним или несколькими антигенами. Это служит для обнаружения специфических антител.

Сыворотка крови инкубируется в лунках планшета, а затем смывается. Если в образце присутствовали антинуклеарные антитела, они останутся связанными с соответствующими антигенами на микротитровальном планшете после промывки.

На следующем этапе теста в лунку планшета добавляется второе антитело, связанное с ферментом. Ферментативная реакция заставляет раствор менять цвет.

Разница в цвете пропорциональна количеству антиген-связанных антител в лунке планшета. Цвет полученного раствора можно оценить спектрофотометрическим методом, то есть путем измерения интенсивности светового луча, прошедшего через раствор.

Тест ANA - наличие ANA в крови здоровых людей

Подсчитано, что у 5% человеческой популяции антинуклеарные антитела присутствуют в крови в концентрации, которая считается диагностически значимой, независимо от наличия болезненного состояния.

Поскольку частота АНА увеличивается с возрастом, до 10-37% здоровых людей старше 65 лет имеют положительный результат теста на наличие АНА. Такие случаи чаще встречаются у женщин, чем у мужчин.

Тест ANA - как называется?

Характерным значением для теста ANA является титр. Он указывает на степень разбавления сыворотки, при которой антинуклеарные антитела становятся неопределяемыми. Чем выше концентрация АНА в крови, тем выше титр в результатах теста.

Тест на специфичность антинуклеарных антител рекомендуется, если титр выше 1: 160. Эти дополнительные тесты должны проводиться в сочетании с анализом истории болезни пациента и физическим осмотром. Цель этих шагов - диагностировать или исключить аутоиммунные расстройства.

Однако следует отметить, что такой результат наблюдается у 5% пациентов независимо от болезненного состояния. Результат теста является диагностическим только при наличии других симптомов заболевания.

Отрицательный результат теста ANA указывает на то, что у пациента маловероятно наличие волчанки или другого аутоиммунного заболевания.

Тест ANA - когда следует проводить тест ANA?

Тест ANA назначается, когда симптомы пациента указывают на системное аутоиммунное заболевание. Они могут быть очень неочевидными и неспецифическими и могут со временем меняться.

Примеры симптомов включают:

• Низкая лихорадка
• Стойкая усталость
• Боль, похожая на артрит
• Красная сыпь
• Чувствительность кожи к свету
• Потеря волос
• Боль в мышцах
• Онемение или покалывание в руках или ногах
• Воспаление органов и тканей (почек, легких, сердца, оболочки сердца, центральной нервной системы и кровеносных сосудов)

Литература:

1. https://labtestsonline.org/tests/antinuclear-antibody-ana
2. «Медицинские тематические рубрики». Национальная медицинская библиотека. 12 февраля 2013 г.
3. «Тест на антинуклеарные антитела: что это значит». Американский фонд волчанки. Дата обращения 7 июня 2013.
4. Кумар, Й; Бхатия, А; Минц, RW (2 января 2009 г.). «Антинуклеарные антитела и методы их обнаружения в диагностике заболеваний соединительной ткани: новое путешествие». Диагностическая патология
5. www.autopróbciala.info
6. Кавано, Артур, Томар, Рассел, Ревейл, Джон, Соломон, Дэниел Х. и другие. Руководство по клиническому использованию теста на антинуклеарные антитела и тестов на специфические аутоантитела к ядерным антигенам. Архив патологии и лабораторной медицины. 124 (1), стр. 71-81, январь 2000 г.

Об авторе

Сара Яновска, докторант междисциплинарной докторантуры в области фармацевтических и биомедицинских наук в Медицинском университете Люблина и Институте биотехнологии в Белостоке, выпускница фармацевтического факультета Люблинского медицинского университета со специализацией в медицине растений. Получила степень магистра, защитив диссертацию в области фармацевтической ботаники об антиоксидантных свойствах экстрактов, полученных из двадцати видов мхов. В настоящее время в своей исследовательской работе он занимается синтезом новых противораковых веществ и изучением их свойств на линиях раковых клеток. Два года работала мастером аптеки в аптеке открытого типа.

Читать больше от этого автора