Антинуклеарные антитела (АНА)

Антинуклеарные антитела являются частью комплексного процесса диагностики системных заболеваний соединительной ткани. Сложный механизм образования антинуклеарных антител затрудняет интерпретацию их результатов, а наличие или отсутствие конкретного антитела не всегда указывает на болезненный процесс. Какие бывают типы антинуклеарных антител? Когда следует проводить тест?

Оглавление:

1. Антинуклеарные антитела - виды
2. Антинуклеарные антитела - образование и механизм действия
3. Антинуклеарные антитела - показания к исследованию
4. Антинуклеарные антитела - что такое тест?
5. Антинуклеарные антитела - как интерпретировать результат?

Антиядерные антитела (ANA) - это аутоантитела, направленные против элементов ядра клетки, например ДНК и цитоплазмы. Они являются одними из самых разнообразных и наиболее изученных антител.

Антинуклеарные антитела - виды

• антитела против экстрагируемых ядерных антигенов (anti-ENA):
• против ДНК-топоизомеразы I (анти-Scl70)
• против рибонуклеопротеина (анти-РНП)
• против антигена Смита (анти-Sm)
• анти-Ми2 / Ми-2
• анти-Ro (SS-A)
• анти-Ла
• анти-Jo1
• анти-PM-Scl
• анти-Kn
• антитела против ядерного порообразующего белка gp-2010 (anti-gp-210)
• антитела против нативной двухцепочечной ДНК (анти-дцДНК)
• антицентромерные антитела (анти-АСА)

Антинуклеарные антитела - образование и механизм действия

Аутоиммунитет - это аномальный ответ иммунной системы против ее собственных тканей, приводящий к появлению аутоиммунных заболеваний.

Описаны различные механизмы аутоиммунитета, одним из которых является высвобождение антигенов, скрытых от иммунной системы, например, в результате воспалительного повреждения ткани.

Затем высвобождаются элементы, обнаруженные в ядре клетки, например ДНК, РНК, гистоны, которые иммунная система начинает распознавать как нечто чужеродное и вырабатывает против них антиядерные антитела.

Антинуклеарные антитела - показания к исследованию

• подозрение на заболевания соединительной ткани:
• системная красная волчанка (наличие антител у 95-100% пациентов; антитела к дцДНК являются специфическим маркером заболевания)
• лекарственная волчанка (95-100% пациентов)
• антифосфолипидный синдром (40-50% пациентов)
• системная склеродермия (80-95% пациентов, особенно антитела к Scl70)
• полимиозит и дерматомиозит (у 40-80% пациентов, особенно анти-Jo1 и анти-Mi2 антитела)
• Синдром Шегрена (48-96% пациентов, особенно анти-Ro и анти-La антитела)
• ревматоидный артрит (около 10% пациентов)
• ювенильный идиопатический артрит (менее 10% пациентов)
• Синдром Рейно (20-60% пациентов)
• фибромиалгия (15-25% пациентов)
• смешанные заболевания соединительной ткани (95-100% пациентов)
• оценка активности заболевания и мониторинг эффективности лечения, например, антитела против дцДНК при системной красной волчанке
• корреляция наличия антител с возникновением специфических симптомов заболевания, например, синдрома Шегрена и наличия антител против Ro и La
• прогнозирование болезни в будущем

Антинуклеарные антитела - что такое тест?

Кровь, взятая из локтевого сгиба натощак, используется для определения антинуклеарных антител.

Методы, используемые для определения антител, очень разные и зависят от типа измеряемого антинуклеарного антитела. В основном это такие иммунологические методы, как:

• ELISA
• RIA
• непрямая иммунофлуоресценция
• метод двойной иммунодиффузии
• вестерн-блот

В случае антинуклеарных антител используется двухэтапная диагностика. Сначала проводится скрининговый тест с использованием метода непрямой иммунофлуоресценции, который отличается высокой чувствительностью.

Метод непрямой иммунофлуоресценции заключается в иммобилизации клеток HEp-2, полученных из эпителиальных клеток человека, на предметном стекле микроскопа.

Клетки этой линии имеют в своей цитоплазме и ядре клетки антигены, которые связывают патологические антитела из крови пациента.

После добавления сыворотки пациента на предметное стекло антинуклеарные антитела связываются со специфическими антигенами и видны под микроскопом благодаря специальным флуоресцентным маркерам.

Преимуществом непрямой иммунофлуоресценции является возможность дифференцировать типы антител на основе типа освещения флуоресцентного красителя.

Например, свечение ядра гомогенного типа указывает на наличие антител против дцДНК или против оцДНК.

Всегда необходимо подтверждать положительный результат скринингового теста. Для этого используются очень специфические иммунологические методы, например вестерн-блоттинг. После обнаружения наличия и идентификации типа антинуклеарного антитела определяется его титр, то есть наивысшее разведение сыворотки, при котором можно обнаружить присутствие антител.

Антинуклеарные антитела - как интерпретировать результат?

Правильный титр антинуклеарных антител должен быть ниже 1:40.

Если скрининговый тест на антинуклеарные антитела отрицательный и нет клинических симптомов, указывающих на системное заболевание соединительной ткани, диагноз не следует расширять за счет включения специфических антител, например, анти-дцДНК, анти-Sm.

Считается, что клинически значимые титры у взрослых составляют ≥ 1: 160, а у детей ≥ 1:40.

В случае положительных результатов предлагается интерпретировать результат теста следующим образом:

• титр 1: 40-1: 80 - пограничный результат (слабо положительный), при отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани не рекомендуется повторять тест или проводить контрольный тест, потому что результаты у большинства людей не меняются с годами
• титр 1: 160-1: 640 - среднеположительный результат, при отсутствии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани рекомендуется повторить тест через 6 месяцев
• титр ≥ 1: 1280 - высокий положительный результат, при наличии клинических симптомов заболеваний соединительной ткани требуется дальнейшая специализированная диагностика для диагностики заболевания

Следует иметь в виду, что серологическое тестирование на антинуклеарные антитела является частью сложного диагностического процесса и положительный результат всегда необходимо интерпретировать в контексте клинической картины и наличия характерных симптомов заболевания.

Антинуклеарные антитела с низким титром обнаруживаются у 5% здорового населения, и их частота увеличивается с возрастом.

Кроме того, их присутствие обнаруживается при физиологических и патофизиологических состояниях, при которых антинуклеарные антитела не имеют диагностического значения:

• инфекции, например туберкулез, сифилис, малярия
• заболевание печени, например цирроз печени
• заболевания легких, например саркоидоз, асбестоз
• раковые заболевания, например лейкемия, лимфома, рак груди, меланома
• кожные заболевания, например псориаз, красный плоский лишай
• после трансплантации органов, например, трансплантации сердца, трансплантации почки
• использование лекарств, например противоэпилептических препаратов, гидралазина, солей лития,
• другие аутоиммунные заболевания, например болезнь Хашимото, болезнь Аддисона, диабет I типа
• беременность (до 20% беременных)

Стоит знать ...

Этническая изменчивость характеризует появление разных типов антинуклеарных антител.

Например, пациенты европеоидной расы с системным склерозом с большей вероятностью будут иметь антитела против АСА, а афроамериканцы и афроамериканцы с большей вероятностью будут иметь антитела, реагирующие на топоизомеразу.

Рекомендуемая статья:

Диагностический тест ANA (антинуклеарные антитела)

Литература

1. Фишер К. и др. Аутоантитела в ревматологической практике. Форум Reumatol. 2016, 2, 1, 39–50.
2. Внутренние болезни, под редакцией Щеклика А., Medycyna Praktyczna Kraków 2010
3. Лабораторная диагностика с элементами клинической биохимии. Справочник для студентов-медиков под редакцией Дембиньской-Кеч А. и Наскальски Ю.В., Elsevier Urban & Partner Wydawnictwo Wrocław 2009, 3-е издание

Об авторе

Каролина Карабина, доктор медицинских наук, молекулярный биолог, лабораторный диагност, Cambridge Diagnostics Polska. Биолог со специализацией в микробиологии и лабораторный диагност с более чем 10-летним опытом лабораторной работы. Выпускник Школы молекулярной медицины и член Польского общества генетиков человека, руководитель исследовательских грантов в лаборатории молекулярной диагностики при отделении гематологии, онкологии и внутренних болезней Варшавского медицинского университета. Защитила звание доктора медицинских наук в области медицинской биологии на 1-м медицинском факультете Варшавского медицинского университета. Автор многих научных и научно-популярных работ в области лабораторной диагностики, молекулярной биологии и питания. Ежедневно, как специалист в области лабораторной диагностики, он руководит основным отделом Cambridge Diagnostics Polska и сотрудничает с командой диетологов в CD Dietary Clinic. Он делится своими практическими знаниями по диагностике и диетотерапии заболеваний со специалистами на конференциях, тренингах, в журналах и на сайтах. Особенно ее интересует влияние современного образа жизни на молекулярные процессы в организме.

Прочитать больше статей этого автора